Основные режимы работы хроматографа.
Хроматограф – сложное многофункциональное устройство, работающее в различных режимах, различающихся по типу элюции, по типу управления, по режиму работы детектора:
- градиентная элюция – элюция с изменяемой по определенному закону концентрацией элюента Б в элюенте А при постоянной объемной скорости;
- изократическая элюция – элюция с постоянной концентрацией элюента;
- ручные операции – режим подготовки прибора. Анализ пробы в ручном режиме невозможен;
- режим тестирования узлов прибора и гидравлической системы в целом;
-
многоволновой режим детекции – детекция производится на нескольких длинах волн, переключаемых по циклической программе;
- одноволновой режим детекции – детекция производится на одной заданной длине волны.
Для
градиентной элюции характерны несколько моментов. При изменении элюирующей силы (концентрации элюента Б) в процессе хроматографии по определенному закону необходимо приведение условий на колонке и в жидкостной системе к некоторым начальным (равновесным) условиям, характерным для момента инжекции пробы. Т.е. необходим этап регенерации колонки, который предшествует нанесению пробы на колонку и элюции. Часто необходима промывка колонки максимально допустимой концентрацией элюента Б в конце этапа элюции с целью вымыть из колонки все вещества, содержащиеся в пробе.
Для
изократической элюции характерно постоянство концентрации элюента в процессе анализа (разделения). Изократическая элюция может рассматриваться как частный случай градиентной. Изократическая элюция может быть "абсолютной", когда в насосах А и Б находится один и тот же элюент, формально насосы могут при этом отрабатывать градиент любой формы. Возможно формирование постоянной произвольной концентрации из двух растворителей А и Б.
Последовательность операций при анализе.
Хроматограф автоматизирован и управляется по программе с компьютера. Все устанавливаемые (задаваемые) параметры анализа записываются в файл метода анализа. Результаты анализа автоматически записываются в файл результата, отчет выводятся на монитор и принтер по указанию оператора. Последовательность операций, автоматически выполняемых в процессе анализа, следующая.
После нажатия кнопки запуска анализа включается насос, концентрация растворителей соответствует начальной концентрации начала хроматограммы и поддерживается до момента загрузки образца. По окончании загрузки образца начинается хроматограмма и градиент начинает изменяться в соответствии с заданной программой. Окончание загрузки для ручного инжектора — перевод в положение «Анализ». Автоматический — окончание по программе или нажатием кнопки на мнемосхеме. С момента начала хроматограммы начинается отсчет заданных параметров по сбору фракций. По окончании выполнения программы по заданию градиента насос продолжает работать (не останавливается), а процентное содержание растворителя Б поддерживается в соответствии с последним значением в таблице градиента.
Набор пробы. В хроматографе реализована инжекция пробы без остановки потока. Для набора пробы используются ручной и автоматический инжекторы. В автоматическом задаётся загружаемый объём, а в ручном применена загрузка с помощью петли фиксированного объёма.
Элюция производится в соответствии с программой. Формирование градиента производится по заданной программе одним насосом и одним электромагнитным клапаном. Форма градиента – произвольная, кусочно-линейная.
Детектирование – начинается с момента нажатия кнопки запуска анализа, запись данных начинается ПОСЛЕ нанесения (инжекции) пробы на колонку.
Условия эксплуатации:
- температура окружающего воздуха от 4 °С до 35 ºС;
-
относительная влажность воздуха от 30 % до 80 %;
-
атмосферное давление от 84 кПа до 107 кПа;
-
напряжение переменного тока, питающего хроматограф по ГОСТ 29322-2014, 230 В ±10 % при частоте 50 ±0,2 Гц.